2023年06月23日
蛋白定量非常不准,所以最好控制细胞量,WB一般需要1-20 million cells。
必须要用WB来确定目标(KO)蛋白表达下降,否则就不该浪费经费进行高通量测序。
我决定重新用lentivirus来侵染细胞,其次再用puro来筛一遍,NA是没有意义的control。
然后做cell counting,最少准备两板,一板提RNA,一板提Protein,取少量细胞做PCR testing。
2023年06月23日
蛋白定量非常不准,所以最好控制细胞量,WB一般需要1-20 million cells。
必须要用WB来确定目标(KO)蛋白表达下降,否则就不该浪费经费进行高通量测序。
我决定重新用lentivirus来侵染细胞,其次再用puro来筛一遍,NA是没有意义的control。
然后做cell counting,最少准备两板,一板提RNA,一板提Protein,取少量细胞做PCR testing。