Lentiviral titer | 慢病毒浓度滴定 | 载体

发布时间 2023-11-02 00:14:54作者: Life·Intelligence

 

载体病毒的质量至关重要,如果活性太弱,那DNA、RNA等就无法被被成功递送到细胞内,整个系统就不会工作了。

所以很多细胞基因治疗方案的瓶颈就在于载体。

 

在实验室里,我们一般用Lentivirus,其容量大、活性高、整合到genome表达稳定。

Lentivirus最好是现做现用,因为lab protocol比较成熟,所以titering就被跳过了,最终用antibiotic筛的时候就能大致估算出titer。

Lentivirus不能放在室温或者4度、20度,即使冻在-80度,其活性也只能维持几周。

 

Tips for Titering Your Lentiviral Preps - By Meghan Rego

两种滴定方式:

  • Physical titer
  • Functional titer

 

如果做大实验,比如CRISPR screen或者Perturb-seq,还需要确保以下两点:

  • high titered Lentivirus
  • even distribution virus prep