PCR Genotyping | 利用PCR来确定基因型

发布时间 2023-06-28 02:07:45作者: Life·Intelligence

 

前面已经利用了PCR做了一些核心的实验:

  • 目标区域扩增
  • 实时定量mRNA

 

这里的目的还是目标区域扩增,不过material不再是细菌DNA,而是human cancer cell line的DNA(只需要几千细胞即可)。

 

Kits和protocol:

 

micromole

 

注意:

  1. Primer的保存浓度是一定的,10nmol + 100ul dw = 0.1 nM/uL,0.5 uM / 0.1 = 5 uL;
  2. 不要直接放入dirty cells,最好使用Dilution & Storage Protocol,98 °C for 5 minutes;

 

然后run一下agar gel,看一下目标区域是否有条带;

然后就可以送样,做sanger sequencing,第二天就能得到结果了。