前面已经利用了PCR做了一些核心的实验:
- 目标区域扩增
- 实时定量mRNA
这里的目的还是目标区域扩增,不过material不再是细菌DNA,而是human cancer cell line的DNA(只需要几千细胞即可)。
Kits和protocol:
micromole
注意:
- Primer的保存浓度是一定的,10nmol + 100ul dw = 0.1 nM/uL,0.5 uM / 0.1 = 5 uL;
- 不要直接放入dirty cells,最好使用Dilution & Storage Protocol,98 °C for 5 minutes;
然后run一下agar gel,看一下目标区域是否有条带;
然后就可以送样,做sanger sequencing,第二天就能得到结果了。