显微镜
显微镜分辨率：概念、因素和计算
在显微镜学中，‘分辨率’一词用于阐述显微镜对细节进行区分的能力。换言之，这是样本内两个能被观察人员或者显微镜摄像头区分的实体点之间的理想的距离。 显微镜的分辨率本质上与光学元件的数值孔径（NA）以及用于观察样本标本的光波长有关。此外，我们必须考虑Ernst Abbe于1873年首次提出的衍射极限。 ......
显微镜的几个概念:分辨率，放大率，最大分辨率，分辨极限
“本文主要介绍有关显微镜的一些重要概念，不论是在科研，还是日常生活当中，这些概念都十分容易混淆。分辨这些概念有助于我们避免误解，更好、更合理地使用显微镜。” 01 分辨率 分辨率是指能够分辨出的相邻两个物点间的最小距离的能力，这种距离称为分辨距离。 一般来说分辨距离越小，分辨率越高。一般规定：显微镜 ......
激光共聚焦显微镜操作要点
开机：12345注：30min内不要反复开关，电脑开机。 打开电脑，运行ZEN软件（黑色），点击ZEN system 物镜界面：触屏选择10×，手轮来调节焦距。 目镜下看：点击locate，再点击BF、绿光、红光 用眼睛观察，找视野，找到样品并且视野清晰 点击光的类型（如GFP），继续移动样品杆找到 ......
蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (八)
13、高级功能：Z-Stack、Tiles、Time Series（该篇目之前的流程每次都要做） （3）Time Series 1、选择“Time Series”； 2、Duration 设置拍摄要持续的时间，有多个单位可选择，如循环数 Cycles 或者其他具体时间； 3、循环之间的间隔 Inte ......
蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (六)
13、高级功能：Z-Stack、Tiles、Time Series（该篇目之前的流程每次都要做） （1）Z-Stack Z-Stack 即 3D 成像，有两种模式。主要使用“First / Last”模式，通过上下边界决定 3D 成像的 Z 轴范围；另一种是“Center”模式，主要通过设定 Z 轴 ......
蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (七)
13、高级功能：Z-Stack、Tiles、Time Series（该篇目之前的流程每次都要做） （2）Tiles 在“Tiles”模块下“Tiles”方法代表以当前视野为中心拍摄拼图， 适合样品较大一个视野拍不下时需要拍下全貌的场景。 1、选择“Tiles”下的“Tiles”方法； 2、“X”&“ ......
蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (五)
11、导出能发表文章的格式 · 软件左上方“File”的“Export / Import”导出或导入的“Export”，界面自动跳到图像处理“Processing”这个界面，且自动在“Method”里面选到“Image Export”。 · 往下有参数设置“Parameters”，可以在“Filet ......
蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (二)
6、每一个通道进行预览，然后调节相应参数 （1）先选中一个通道，例如“mCherry"，再点击左上角“Live”图像预览； （2）可以通过鼠标双击的方式进行调焦或者调节视野位置。 · 比如把靠上的圈圈调到视野中间，双击圈圈，它会自动到整个预览视野的中间位置。 · 比如调节焦距，按住 Ctrl，调节鼠 ......
蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (三)
7、准备拍摄 （1）Frame Size 分辨率：图像越大，分辨率提高，但扫描时间越长。 一般杂志要求是 1k*1k 左右，即“1024*1024”，更高 2048 或 4096，或者直接用“Optimal”系统认为最佳分辨率。 （2）调节信噪比的两个参数：Scan Speed，Averaging ......
蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (四)
10、图像处理 （1）图像下面“Graphics”里面，第一排是比较常用的小工具。 “Graphics”比较常用的小工具 ①第一个虚线框的作用是截图，选中区域后点一下鼠标右键，点“Create Subset Images from ROI”。点完后会新生成一张图像。（截图会造成像素损失） · 如不想 ......
蔡司激光共聚焦荧光显微镜 (一)
普通显微镜成像与共聚焦显微镜成像？ 1、开机顺序：1→2→3→4→5→6→7 ①②——控制器，通电电源 ③——激光器开关（转动钥匙） ④——汞灯电源（开关间隔 30min以上） 金属卤化物灯“X-cite 120” 金属卤化物灯“HXP 120” ⑤——显微镜开关 ⑥——载物台开关 ⑦——电脑开关 ......
共聚焦显微镜针孔效应
共聚焦显微镜针孔效应 在操作共聚焦显微镜，或在讨论这种装置的特性和参数时，我们不可避免地提到针孔及其直径。这篇简短的文章是针对那些没有足够时间钻研共聚焦显微镜的理论和细节但又想了解针孔效应的用户们来解释针孔的意义。 什么是针孔？ 基于透镜的光学仪器主要涉及两个参数：透镜曲率和直径。曲率决定了平行光线 ......
实战案例 | 双束聚焦离子束（DB-FIB）和透射电子显微镜（TEM）在芯片失效分析中的组合应用
在做HTGB（高温栅偏测试）项目时，出现了Pass die漏电较小，Fail die IGSS漏电过大 (＞200nA) 的情况。需要对漏电大的芯片进行复测，同时定位漏电所在的位置（热点Hot spot）。之后再利用FIB/TEM对漏电位置进行微观结构/成分分析，找到漏电点所在的膜层；最后基于电镜分 ......